丙泊酚对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织c-Jun氨基末端激酶活性的影响

陈龙

成勤

陈西艳

房孝梅

张茂银

张稳稳刘功俭

　　　　［摘要］目的　探讨大鼠内毒素性急性肺损伤（ａｃｕｔｅ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ，ＡＬＩ）时应用丙泊酚后处理对肺组织磷酸化ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶（ｐｈｏｓｐｈｏ－ｃ－Ｊｕｎ　ｔｅｒｎｉｎａｌ　ｋｉｎｎａｓｅ，ｐ－ＪＮＫ）的影响。　　方法　９６只雄性ＳＤ大鼠按数字随机表法分为４组（每组２４只）：生理盐水对照组（Ａ组）；内毒素［有效成分为脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）］致伤组５　ｍｇ／ｋｇ尾静脉注射，Ｂ组）；丙泊酚低剂量治疗组（丙泊酚２　ｍｇ／ｋｇ诱导后，４　ｍｇ・　ｋｇ－１・ｈ－１维持，Ｃ组）；丙泊酚高剂量治疗组（丙泊酚４　ｍｇ／ｋｇ诱导后，８　ｍｇ・　ｋｇ－１・ｈ－１维持，Ｄ

组）。每组大鼠均在诱导后１、２、３、４　ｈ时经放血处死大鼠（采用放血法随机活杀６只大鼠并留取肺组织标本），用免疫蛋白印迹

法（ｗｅｓｔｅｒｎ　－ｂｌｏｔ）和免疫组织化学法（ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅ－ｍｉｃａｌ，ＩＨＣ）检测肺组织ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶（ｃ－Ｊｕｎ　ｔｅｒｎｉｎａｌ　ｋｉｎａｓｅ，ＪＮＫ）磷

酸化的水平。　　结果　ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ和ＩＨＣ显示Ｂ、Ｃ、Ｄ３组各时点肺组织ＪＮＫ磷酸化水平较Ａ组均显著升高（Ｐ＝０．０２～０．０３＜０．０５或Ｐ＝０．００６～０．００８＜０．０１），３ｈ时ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ达到了３２２±３２，比Ａ组相同时点有显著升高（Ｐ＝０．００２＜０．０１）；ＩＨＣ显示ｐ－ＪＮＫ为２１．７±４．４，比Ａ组也有明显的增多（Ｐ＝０．００３＜０．０１）。Ｃ组和Ｄ组大鼠的肺组织ｐ－ＪＮＫ与Ｂ组各时点相比有显著的降低（Ｐ＝０．０３　～０．０４＜０．０５或Ｐ＝０．００７～０．００８＜０．０１），ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ显示３　ｈ　ｐ－ＪＮＫ时分别下降到了２３５±２６和１７９±２１，而ＩＨＣ则降低至１５．１±３．１

和１２．３±１．７。Ｄ组ｐ－ＪＮＫ与Ｃ组相比，在诱导后３ｈ也有显著地下降，其余各时点相比无统计学意义。结论　丙泊酚可以显著抑制内毒索性ＡＬＩ大鼠肺组织中ｐ－ＪＮＫ的表达。

丙泊酚；　　内毒素；急性肺损伤；ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶

Ｐｒｏｐｏｆｏｌ　ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ　ｃ－Ｊｕｎ　ｔｅｒｎｉｎａｌ　ｋｉｎａｓｅ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｌｉｐｏｐｏｌｇｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｃｕｔｅ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｒａｔｓ

ＣＨＥＮ

ＨＡＮＧ　Ｗｅｎ　－ｗｅｎＬＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｍｅｉＺＨＥＮ　Ｘｉ－ｙａｎＦＨＡＮＧ　Ｍａｏ　－ｙｉｎＺＩＵ　Ｇｏｎｇ　－ｊｉａｎＬｏｎｇＣＨＥＮＧ　ＱｉｎＣ

Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，　ｔｈｅ　Ｓｉｘｔｈ　Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｘｕｚｈｏｕ，　Ｘｕｚｈｏｕ　２２１００６，　Ｃｈｉｎａ　

Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃ　－Ｊｕｎ　ｔｅｒｎｉｎａｌ　ｋｉｎａｓｅ　（ＪＮＫ）　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｐｏｓｔ　－ｔｒｅｓｔｅｄ　ｂｙ　ｐｒｏｐｏｆｏｌ　ｏｎ　

ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｃｕｔｅ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ．　　Ｍｅｔｈｏｄｓ　　Ｎｉｎｅｔｙ　ｓｉｘ　ｍａｌｅ　ＳＤ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　４　ｅｑｕａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　（ｎ＝２４）　：ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（０．９％　ｓｏｄｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｇｒｏｕｐ）；　Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　（ＬＰＳ）　ｇｒｏｕｐ　（ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＬＰＳ　５　ｍｇ／ｋｇ）；　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｐｒｏｐｏｆｏｌ　ｇｒｏｕｐ　（２　ｍｇ／ｋｇ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｄ　４　ｍｇ・ｋｇ１・ｈ－１　ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ）；　ｌａｒｇｅ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｐｒｏｐｏｆｏｌ　ｇｒｏｕｐ　　（４　ｍｇ／ｋｇ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｄ　８　ｍｇ・ｋｇ－１　・ｈ－１　

ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ）．　Ｓｉｘ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｋｉｌｌｅｄ　ａｔ　ｅａｃｈ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔ　ａｆｔｅｒ　ＬＰＳ　ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　　（ｓａｌｉｎｅ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇｓ　ｗｅｒｅ　ｈａｒｖｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈｏｓｐｈｏ　ｃ－Ｊｕｎ　ｔｅｒｎｉｎａｌ　ｋｉｎａｓｅ　（ｐ－ＪＮＫ）　ｗａｓ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ　

ａｎｄ　Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅ－ｍｉｃａｌ　（ＩＨＣ）．　　Ｒｅｓｕｌｔｓ　　Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ　ａｎｄ　ＩＨＣ　ｓｈｏｗｎ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＪＮＫ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　

ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ａｆｔｅｒ　ＬＰＳ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　（Ｐ＝０．０２－０．０３＜０．０５　ｏｒ　Ｐ＝０．００６－０．００８＜０．０１　）　．　Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆｐ－ＪＮＫ　ｗａｓ　３２２±３２　ａｎｄ　２１．７±４．４　ｓｈｏｗｎ　ｂｙ　ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ　ａｎｄ　ＩＨＣ　ａｔ　ｔｈｅ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔ　ｏｆ　３　ｈ　ａｆｔｅｒ　ＬＰＳ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．　Ｔｈｅ　ｐ　－ＪＮＫ　ａｔ　ａｌｌ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔｓ　ｄｅｃｌｉｎｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　

ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｐｒｏｐｏｆｏｌ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｃ　ａｎｄ　ｇｒｏｕｐ　Ｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐ－ＪＮＫ　ｄｅｃｌｉｎｅｄ　ｔｏ　２３５±２６　ａｎｄ　１７９±２１（ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ）　ａｎｄ　１５．１±３．１　ａｎｄ　１２．３±１．７（ＩＨＣ）　ａｔ　ｔｈｅ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔ　ｏｆ　３　ｈ．　Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｇｒｏｕｐ　Ｃ，　ｐ－ＪＮＫ　ｄｅｃｌｉｎｅｄ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｄ　ａｔ　ｔｈｅ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔ　ｏｆ　３　ｈ　ａｆｔｅｒ　ａｆｔｅｒ　ＬＰＳ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．　　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｐｒｏｐｏｆｏｌ　ｃａｎ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ａｔｔｅｎｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｐ　－ＪＮＫ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ＬＰＳ－

ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｃｕｔｅ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｒａｔｓ．

Ｐｒｏｐｏｆｏｌ；　　Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ；　　Ａｃｕｔｅ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ；　　Ｃ－Ｊｕｎ　ｔｅｒｎｉｎａｌ　ｋｉｎａｓｅ

１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ　．ｉｓｓｎ．　１６７３　－４３７８．２０１１．１０．００３

江苏省“六大人才高峰”基金资助项目（０６－Ｂ－０６５）；徐州市铜山区社会发展基金资助项目（ＴＳ００５）

２２１００６，徐州市第六人民医院麻醉科（陈龙、陈西艳、房孝梅）；徐州医学院附属医院麻醉科（张茂银、张稳稳、刘功俭）；江苏省江门市

人民医院麻醉科（成勤）

万方数据万方数据５２１

５２２

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＠＠２．　　Ａｒｎｄｔ　ＰＧ，　Ｙｏｕｎｇ　ＳＫ，　Ｌｉｅｂｅｒ　ＪＧ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃ　－Ｊｕｎ　Ｎ

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　　　　　　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｓｈｏｃｋ　ｉｎ　ｃｏｎｓｃｉｏｕｓ　ｒａｔｓ．　Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，　２００５，

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万方数据