质粒的携带
1) 甘油菌。将质粒转入细菌,加入甘油,蜡膜封口。
2) 2)滤纸。如楼上所说。我刚收到一个从国外寄来的质粒,是点在滤纸上的,用铝箔质包着,用10mM Tris,或水泡1小时就可以
3) 3)塑料袋。做一个很小的塑料袋,把质粒加入其中,封口(像做western的时候那样封口)。有一个日本人给我就是这样给的。
4) 4)直接携带。就把质粒装在离心管,蜡膜封口。
5) 4.1 质粒可以用无菌水也可以用TE,或者其他的
6) 4.2 在质粒中加入无水乙醇或者70%乙醇(都可以),蜡膜封口,用时沉淀一下即可。
7) 以上方法使用时不要贴身,放在水深随身的包里。到达实验室后尽快冻存。
DNA的化学性质其实是比较稳定的缓冲液影响不大,
我建议你冻干,如果你是手提的质粒,加酒精离心沉淀后,冻干一下甚至烘干、风干都是可以的。如果是试剂盒提纯的,加究竟沉淀离心后再冻干。
用滤纸其实也是相当于冻干的作用-非水相环境中酶的作用难以发挥,所以DNA降解
慢。
就象你合成引物拿到的离心管一样,需要使用的时候离心下再溶解于原体积的水就可以了。
冻干的样品是很安全的,我曾在夏天携带过一批质粒,那时候气温都在37度以上,用手抽的,连RNA都没去,在超净台上吹干后在我的包里放了一个星期,照样可以使用。
1)我不知道你为什么要问是不是滤纸灭菌,有这些时间不知道滤纸已经被灭菌多少次了!可以把滤纸装在饭盒里面高压灭菌,画一个圆圈,大约1cm直径,然后加入高浓度plasmid,吸收后转入干净的塑料袋或者信封均可。到达目的实验室后,将圆圈部分滤纸剪下,再剪碎,放入离心管,加入溶液(无菌水和TE均可)大约50-100uL,浸泡30-60min,用枪吹打数次,离心后取上清进行转化。提取质粒后,如果有必要进行一次鉴定。
2)冻存就是-20度,一般的质粒保存温度。
3)家庭用的冰箱有没有-20度,你应该看冰箱!
4)就溶液而言,无菌水,TE,Tris等都可以,对于转化没有差异性影响。
5)楼上说的冻干是一个很好的办法,但是有的实验室没有相应的条件。
6)1天1夜时间我上边提到的方法都应该没有问题。
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