气相色谱-质谱联用分析亚临界二氧化碳流体萃取八角茴香油的化学成分

ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００８　ＶＯＬ．１９　ＮＯ．４　时珍国医国药２００８年第１９卷第４期　气相色谱一质谱联用分析亚临界二氧化碳流体　萃取八角茴香油的化学成分　郭　勇　，雷衍国。，缪剑华　，陈乾平　，覃柳燕　（１．广西药用植物园，广西南宁５３００２３；２．广西大学林学院，广西南宁５３０００５）　摘要：目的考察亚临界ＣＯ：流体萃取八角茴香油的得率，并分析茴香油的组分及其相对含量。方法采用亚临界ｃ０：　流体萃取八角茴香油，并通过ＧＣ—ＭＳ技术对亚临界ＣＯ：流体萃取八角茴香油的组分及其相对含量进行分析。结果八　角茴香油的得率可达到１２．５３％；共从茴香油中检出２２１个化合物，鉴定了其中的８２个化合物，茴香油中７种主要组成　成分的含量均能达到相关标准要求。结论采用亚临界ＣＯ：流体萃取，八角茴香油的得率高、品质好，在生产上推广利用　前景广阔。　关键词：亚临界二氧化碳萃取；　八角茴香油；　气相色谱一质谱分析　中图分类号：Ｒ２８４．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０８０３－０３　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｇａｓ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ——Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｓｔａｒ　Ａｎｉｓｅ　Ｏｉｌ　ｂｙ　Ｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌ　ＣＯ，ＦＩｕｉｄ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｌｌ１优．　ｍ　ｖｅｒｕｍ　Ｈｏｏｋ．ｔ．　ＧＵＯ　Ｙｏｎｇ　，ＬＥＩ　Ｙａｎ—ｇｕｏ　，ＭＩＵ　Ｊｉａｎ—ｈｕａ　，ＣＨＥＮ　Ｑｉａｎ—ｐｉｎｇ　，ＱＩＮ　Ｌｉｕ—ｙａｎ　（１．Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｂｏｔａｎｉｃａｌ　Ｇａｒｄｅｎ　ｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ　Ｐｌａｎｔｓ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３００２３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｆｏＧａｕｎｇｘｉ　Ｕ－　ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３０００５．Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｓｔａｒ　ｎａｉｓｅ　ｏｉｌ　ｆｒｏｍ　Ｉｌｌｉｃｉｕｍ　ｖｅｒ１．１］ｎ　Ｈｏｏｋ．ｆ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｓｔａｒ　ａｎｉｓｅ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｉｌｌｉｃｉｕｍ　ｖｅｌｕｍ　Ｈｏｏｋ．ｆ．ｂｙ　ｓｕｂｃｆｉｔｉｃａｌ　ＣＯ２　ｆｌｕｉｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎ—　ｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ＧＣ～ＭＳ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｓｔａｒ　ａｎｉｓｅ　ｏｉｌ　ｃｏｕｌｄ　ｒｅａｃｈ　１２　％，２２１　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｓｔａｒ　ａｎｉｓｅ　ｏｉｌ　ａｎｄ　８２　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅｍ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　７　ｍｏｓｔ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｏｆ　ｓｔｒａ　ａｎｉｓｅ　ｏｉｌ　ｃｏｕｌｄ　ｒｅａｃｈ　ｔｈｅ　ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌ　ＣＯ２　ｆｌｕｉｄ　ｅｘｔｒａｃ—　ｔｉｏｎ　ｉｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｌｌｉｃｃｉｕｍ　ｆｆｅｒｕｍ　Ｈｏｏｋ．ｆ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｕｂｅｒｉｔｉｃａｌ　ＣＯ２　Ｆｌｕｉｄ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；　Ｏｉｌ　ｏｆ　ｓｔｒａ　Ａｎｉｓｅ；　Ｇａｓ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｙ—Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　八角Ｉｌｌｉｃｉｕｍ　ｖｅｌｕｍ　Ｈｏｏｋ．￡为木兰科八角属植物，又，ｑ／ｋ角　１仪器与试剂　茴香（《本草纲目》）、大茴香、唛角（广西壮语），是我国南方重要　１．１　材料供试材料为新鲜八角秋果，采自广西壮族自治区防城　的“药食同源”经济树种，主产于广西西部和南部，福建南部、广　港市十万林场。经广西药用植物园资源室主任余丽莹（副研究　东西部、云南东南部和南部也有种植…。八角是我国传统著名　员）鉴定为木兰科八角属植物八角Ｉｌｌｉｃｉｕｍ　ｒｅｒｕｎ　Ｈｏｏｋ．￡的果实。　的调味香料，也供药用，有祛风理气、和胃调中、温阳散寒、理气止　１．２仪器与试剂ＨＬ一５＋１Ｉ＿／５０一Ｈ　ＡＱ型超临界ＣＯ：萃取装　痛等功效，用于中寒呕逆、腹部冷痛、胃部胀闷等治疗　Ｊ。近年　置（杭州华黎泵业有限公司）；ＣＰ一３８００型气相色谱仪（美国　来的研究表明，八角还具有较好的抑菌、镇痛、杀虫活性及抗自由　ＶＡＲＩＡＮ公司）；Ｓａｔｕｒｎ２０００型离子阱质谱仪（美国ＶＡＲＩＡＮ公　基氧化等作用　’８＿。　司）；ＤＨＧ一９２４０Ａ型电热鼓风恒温干燥箱（上海精密试验设备　八角果皮、种子、叶都含芳香油，称八角茴香油，用于制造甜　有限公司）；水分测定器（５００　ｍ１）（上海建强玻璃仪器有限公　香酒、啤酒等食品工业，也是制造牙膏、香皂、香水、化妆品的香　司）；ＣＯ：（纯度Ｉ＞９９．９％，水分含量≤２０　ｐｐｍ）；高纯氦（纯度≥　料，还是合成雌激素己烷雌酚的原料　一“Ｊ。长期以来生产上　９９．９９９％）；无水乙醇（分析纯）；无水硫酸钠（分析纯）。　都是采用水蒸气蒸馏法提取八角茴香油，得率低、耗时耗能，且由　２方法　于蒸馏过程中温度高、受热时间长，部分呈香物质容易被分解，所　２．１八角茴香油的提取将八角鲜果置于６ｏ℃烘箱中烘干，采　得产品难以保持原有的天然芳香和天然色调。采用超临界ＣＯ　用甲苯法　测定其水分含量为５．０％。粉碎，过２０目筛。称取八　萃取技术则能较好地解决上述矛盾　ｌｌＵ＿，但由于萃取压力高、设　角果粉２００　ｇ，采用笔者经过正交实验和随机区组实验筛选出的　备投资大、仪器运行消耗的能源和ＣＯ：费用高，严重制约着超临　最佳亚临界ＣＯ：萃取工艺进行萃取，控制萃取釜的压力为７　界ＣＯ：萃取工业化生产八角茴香油的发展。为降低设备投资和　ＭＰａ，温度为２５℃；分离釜Ｉ压力为７　ＭＰａ，温度为３０℃；分离釜　生产成本，本实验采用亚临界ＣＯ：萃取技术萃取八角茴香油，并　Ⅱ压力为５　ＭＰａ，温度为２５℃；萃取时间为２．０　ｈ。收集萃取物，　结合气相色谱一质谱技术对所得茴香油进行成分分析，以期为亚　自然解冻至室温，用无水硫酸钠脱水，得到具有浓郁芳香味的黄　临界ＣＯ：工业化生产八角茴香油提供参考。　色透明液体，密封低温避光保存，以备ＧＣ—ＭＳ分析用。　２．２样品处理精密称取茴香油１．０００　０　ｇ，加入３　ｍｉ无水乙醇　收稿日期：２００７－０６．３０；修订日期：２００７－０９－２５　（分析纯），超声波振荡１０　ｍｉｎ后用０．４５　孔径的微孔滤膜过　基金项目：国家科技攻关计划“西部开发”重大项目（Ｎｏ．２００５ＢＡ９０１Ａ０９）　滤，收集滤液供ＧＣ—ＭＳ分析用。　作者简介：郭勇（１９８０一），男（汉族），四川遂宁人，现任广西药用植物园　２．３色谱条件ＣＰ—ｗａｘ５２毛细管色谱柱（３０　ｍ×０．２５　ｍｍ×　研究实习员，硕士学位，主要从事药用植物的提取分离研究工作．　０．２５　ｍ），载气为高纯氦气（９９．９９９％），流速１．０　ｍｌ／ｍｉｎ，进样　通讯作者简介：缪剑华（１９６１一），男（汉族），江苏南通人，现任广西药用　口温度２６０℃，进样量１　Ｉｘｌ，分流比为５０：１。起始柱温为８０℃，　植物园高级经济师，博士学位，主要从事中药经济管理和药用植物生态学　保留２　ｍｉｎ，然后以５℃／ｍｉｎ升温至２５０℃，保留１４　ｍｉｎ，总分析　研究工作．　时间为５０　ｍｉｎ。　・８０３・　维普资讯 http://www.cqvip.com

时珍国医国药２００８年第１９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００８　ＶＯＬ．１９　ＮＯ．４　２．４质谱条件ＥＩ电离方式，电子能量７０　ｅＶ，离子阱温度２３０　茴香油的７种主要化学成分，按出峰顺序分别是：反式一　一香柠檬　℃，质量扫描范围为４０～３５０　ａｍｕ，质谱检测时间０．５～５０　ｍｉｎ。　烯（ｔｒａｎｓ一仅一Ｂｅｒｇａｍｏｔｅｎｅ）、ｐ～石竹烯（ｐ—Ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｅｎｅ）、顺　ＧＣ／ＭＳ传输杆温度为２８０￣Ｃ。　式茴香脑（ｃｉｓ—Ａｎｅｔｈｏｌｅ）、草蒿脑（Ｅｓｔｒａｇｏｌｅ）、反式茴香脑（ｔｒａｎｓ　２．５　Ｇｃ—ＭＳ分析以ＥＩ为电离源，进行ＧＣ—ＭＳ分析，采集　Ａｎｅｔｈｏｌｅ）、茴香醛（Ａｎｉｓｉｃ　ａｌｄｅｈｙｄｅ）和小茴香灵（对丙烯基苯　所得质谱图，通过Ｓａｔｕｒｎ　ＧＣ／ＭＳ　Ｗｏｒｋｓｔａｔｉｏｎ（Ｖｅｒｓｉｏｎ　５．５２）工作　酚异戊烯醚，Ｆｏｅｎｉｃｕｌｉｎｅ）。图２为茴香油中最主要的组分和呈　站，运用ＮＩＳＴ　Ｌｉｂｒａｒｙ（２００２版）与Ｓａｔｕｒｎ标准谱库对质谱数据进　香物质——反式茴香脑的质谱图。亚临界ＣＯ，萃取八角茴香油　行检索，并结合参考文献对检出成分进行定性分析¨　ｊ。依据　的化学组分及相对含量见表１。　—总离子流色谱图中的色谱峰面积，按面积归一化法来计算各组分　的含量，各组分的相对含量计算公式如下：　ｑ　ＴｒＩｔｎ　ｓ．＾¨帅ｈ　１ｌ　化合物的相对含量（％）＝　蔷　∑—　ｘｌＯ０　＝呈　ｆ　主　专　ｏ　Ｉ　三　式中：Ｍｒ．ｉ代表被鉴定的第ｉ个化合物的分子量　代表被鉴定的第ｉ个化合物中所含的碳原子数　代表被鉴定的第ｊ个化合物的峰面积　二　表示被鉴定的第ｉ个化合物的相对峰面积　　．妊　一　图１　亚临界ＣＯ２萃取的八角茴香油的总离子流图　１（）０％　７５％　５０％　【８　∑竺　总和　３结果　表示所有被鉴定的化合物的相对峰面积的　２５％　ＩＯ０％　７　５％　５０％　１　．ｆ　ｆ。　ｌ　６ｌ　　ｌ７３　ｌ　１８　３．１亚临界ＧＯ　萃取通过３次平行实验，在上述亚临界ＣＯ　萃取条件下，八角茴香油的得率分别为：１２．１４％，１２．４９％，　．，　＿ｌｃ　；　１２．９３％，平均得油率为１２．５２％，相对标准偏差为３．１６％，表明　实验重复性较好。　２５％　。　…　７　７。一　ｆ　ｆ。　１　００％　５０％　０％　－　５０％　ｌ　００％　３．２　Ｇｃ—ＭＳ分析图１为亚临界ＣＯ：萃取的八角茴香油经气　相色谱一质谱分析后所得的总离子流图，图中所标化合物为八角　２　～一而～‘—再—～１而　一　ｌ（）一　图２反式茴香脑的质谱图　表１　亚临界ＣＯ　萃取八角茴香油的化学成分及相对含量　・８０４・　维普资讯 http://www.cqvip.com ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００８　ＶＯＬ．１９　ＮＯ．４　时珍国医国药２００８年第１９卷第４期　４讨论　一蒎烯（０．２１３　５％）、　一甜没药烯（０．２１２　２％）、反式一　一香　在亚临界ＣＯ　萃取的八角茴香油中共检出２２１个化合物，鉴　柠檬烯（０．１９５　３％）、萜品一４一醇（０．１７５　９％）、△　一蒈烯　定了其中的８２个化合物，被鉴定化合物峰面积占总峰面积的　（０．１６４　７％）、Ｂ一水芹烯（０．１５０　０％）、　一萜品醇（０．１３９　１％）、　９９．２８％。在被鉴定出的８２种化合物中，萜类化合物的数量最　一柏木烯（０．１３５　６％）、　一金合欢烯（０．１０３　０％）等；非萜类脂肪　多，主要为单萜类化合物和倍半萜类化合物，分别有２０种和２３　族化合物的相对含量仅为０．６０６　７％，主要化合物有：乙酸葑酯　种，二萜类化合物仅１种；其次为芳香族化合物，有３０种；非萜类　（０．４９３　４％）、反式橙花叔醇（０．１１９　６％），棕榈酸（０．０２７　１％）　脂肪族化合物仅８种。从化合物的相对含量来看：芳香族化合物　等。从茴香油的质量来看：顺式茴香脑（０．４１３　６％）、反式茴香脑　的相对含量较高，为９４．３１５　０％，主要化合物有：反式茴香脑　（９１．２１７　８％）、草蒿脑（０．１５４　７％）、小茴香灵（１．０４１　２％）、茴香　（９１．２１７　８％）、小茴香灵（１．０４１　２％）、顺式茴香脑（０．４１３　６％）、　醛（０．２６６　０％）、反式一　一香柠檬烯（０．１９５　３％）、Ｂ一石竹烯　对甲氧基肉桂酸乙酯（０．３９６　６％）、异丁香酚（０．３７１　０％）、茴香　（０．２７７　５％）为八角茴香油的７种主要成分和呈香物质，其含量　醛（０．２６６　０％）、草蒿脑（０．１５４　７％）等；萜类化合物相对含量总　均在八角茴香油的国际标准［ＩＳＯ　１１０１６：１９９９（Ｅ）］ｎ　和出口八　和为５．０７８　５％，主要化合物有：Ｄ一柠檬烯（１．７２１　４％）、桉油精　角茴香油标准（ＳＮ／Ｔ　００３９—１９９２）　规定的范围之内，八角茴香　（０．４５９　２％）、Ｂ一石竹烯（０．２７７　５％）、大香叶烯Ｄ（０．２１９　８％）、　油品质好。从茴香油的得率来看，采用亚临界ＣＯ　萃取，八角茴　香油的得率可达１２％以上，远高于目前生产上采用水蒸气蒸馏　・８０５・　维普资讯 http://www.cqvip.com

时珍国医国药２００８年第１９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００８　ＶＯＬ．１９　ＮＯ．４　法提取八角茴香油４％～６％的得油率，且茴香油的芳香味更浓［７］　方玉珍，宋杰云，岑燕飞，等．毒八角酸的镇痛作用研究［Ｊ］．贵阳中　郁，更接近八角的真实香味。综上所述，采用亚临界ＣＯ，萃取八　医学院学报。１９８９。１：５９．　角茴香油品质好、得率高，在生产上推广利用前景广阔。　ｌ　８］　黄建梅，杨春澍．八角科植物化学成分和药理研究概况［Ｊ］．中国药　参考文献：　…　学杂志，１９９８，３３（６）：３２１．　［１］　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志（第三十卷第一分　高彦祥，Ｂ．Ｓｉｎａｎｄｉ．超临界ＣＯ２萃取小茴香油的初步研究［Ｊ］．中　册）［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９６：２２８．　…　国食品添加剂，１９９７，２：８．　［２］黄卓民．八角［Ｍ］．北京：中国林业出版社，１９９４：２３．　曾健青．张镜澄．液态及超临界ＣＯ２萃取八角茴香油的研究［Ｊ］．广　［３］　国家药典委员会．中国药典（２００５版Ｉ部）［Ｓ］．北京：化学工业出　，　州化学，１９９７，２：３０．　版社，２００５：４．　…　赵钰玲，戚欢阳，李菊白，等．固相微萃取法结合ＧＣ—ＭＳ分析八角　［４］曹雁平．食品调味技术［Ｍ］．北京：轻工业出版社，２００２：１１３．　，　茴香中挥发性化合物［Ｊ］．分析测试技术与仪器，２００６，１２（１）：２０．　［５］Ｄｅ　Ｍ，Ｄｅ　Ａ　ｋ，Ｓｅｎ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ，Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ　Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　０ｆ　ｓｔａｒ　ａｎｉｓｅ　谢良，许时婴．ＧＣ／ＭＳ分析八角茴香油［Ｊ］．中国油脂，１９９７，２２　（ｆｌｌｗｉｕｍ　ｔ￣ｒｕｍ　Ｈｏｏｄ．　）［Ｊ］．Ｈｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００２，１６　ｒ１。］　（５）：４３．　（１）：９４．　”ｊ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｓｔａｎｄａｒｄ．Ｏｉｌ　ｏｆ　ｓｔｒａ　ａｎｉｓｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｔｙｐｅ（Ｈｌｗｉｕｍ　ｔ￣ｌ＇ｌｌＪｎ　［６］Ｉｓａｏ　Ｋｏｕｎｏ．Ｃｈｕｎ－ｓｈｕ　Ｙａｎｇ、Ｔａｋｕｙａ　Ｍｏｆｉｓａｋｉ，ｅｔ　ａ１．Ｔｗｏ　ｎｅｗ　ｓｅｓ－ｒ１　ｄ］　Ｈｏｏｋ．　）［Ｓ］．ＩＳＯ　１１０１６：１９９９（Ｅ）．　ｑｕｉｎｅｏｌｉｇｎａｎｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂａｒｋ　ｏｆ　ｌｌｌｉｃｉｕｍ　ｄｕｎｎｉａｎｕｍ　Ｊ］．Ｃｈｅｍ　Ｐｈａｍ　中华人民共和国专业标准．出口八角茴香油［Ｓ］．ＳＮ／Ｔ００３９．　Ｂｕｌ１．，１９９１．３９（１０）：２６０６．　裙带菜茎硫酸多糖体外　抗单纯疱病毒Ｉ型活性的实验研究　郝静　，王一飞　，张美英　，刘秋英　，康琰琰　（１．暨南大学生物医药研究开发基地，广东广州５１０６３２；　２．广东省体育科学研究所，广东广州５１０６６３）　摘要：目的研究裙带菜茎多糖体外抗单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ一１）活性。方法采用空斑减数实验测定裙带菜茎粗多糖　及纯化后多糖抗ＨＳＶ一１活性，计算它们的空斑抑制率和Ｉｃ　，并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对　病毒释放的影响３个方面初探裙带莱茎多糖抗单纯疱疹病毒活性机理。结果裙带菜茎多糖能明显抑制ＨＳＶ一１的致病　变作用，Ｉｃ５０依次为８、０４，１３．５４　ｍ１。药物对病毒没有直接灭活作用，对病毒的释放也没有影响，主要影响了病毒的吸　附。结论裙带菜茎多糖有显著的抗ＨＳＶ一１活性，且粗多糖比纯化后多糖活性要好，并且可以初步推测裙带菜茎多糖抗　ＨＳＶ一１活性是作用在病毒和受体结合、侵入Ｖｅｒｅ细胞阶段。　关键词：裙带菜茎；细胞病变效应法（ＣＰＥ）；Ｍ１Ｔｒ法；　空斑抑制率　中图分类号：Ｒ２８５，５　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０８０６－０４　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ａｎｔｉｖｉｒｕｓ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｒｕｄｅ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｃａｕｄｅｘ　ｏｆ　ｄａｒ／ａ　ｐｉｎｎａｔ￣ｆｕｔａ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ＨＡＯ　Ｊｉｎｇ　，ＷＡＮＧ　Ｙｉ—ｆｅｉ　，ＺＨＡＮＧ　Ｍｅｉ－ｙｉｎｇ　，ＬＩＵ　Ｑｉｕ－ｙｉｎｇ　，ＫＡＮＧ　Ｙａｎ—ｙａｎ　（１．Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｊｉｎａｎ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　Ｃｅｎｔｅｒ，ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，５１０６３２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　ＰｒＤｖｉｎｃｉａＺ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｓｐｏｒｔｓ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５　１０６６３．Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ａｎｔｉ—Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　１　ｖｉｒｕｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｃａｕｄｅｘ　ｏｆ　Ｕｎｄａｒｉａｐｉｎｎａｔｆｉｉｄａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＨＳＶ一１　ｗａｓ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｏｎ　Ｖｅｒｏ　ｃｅＨｓ，ｐｏｌｙｓａｃｃｈａ６ｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｃａｕｄｅｘ　ｏｆ　Ｕｎｄａｒｉａ　ｐｉｎｎａｔ一　ｄａ　ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｉｎ　ｖａ￣ｏｕｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ａｆｔｅｒ　７２　ｈｏｕｍ　ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ，ｐｌａｑｕｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｕｎｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　５０％ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（Ｉｃ５０）ｗａｓ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ｉｎ　Ｐｌａｑｕｅ　ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ　ａｓｓａｙ．Ｉｎｉｔｉａｌ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｎａｔｉｖｉｕｒｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｉｎ　ｈｔｒｅｅ　ａｓｐｅｃｔｓ：ｖｉｕｒｓ　ｉｎ—　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．ｔｈｅ　ｄｒｕｇ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｖｉｕｒｓ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａ６ｄｅ　ｈａｄ　ｃｏｎｓｐｉｃｕｏｕｓ　ａｎｔｉ—Ｈｅｒ－　ｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　１　ｖｉｒｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｔｈｅｉｒ　ＩＣ５０　ｗｅｒｅ　８．０４　ｇ／ｍｌ，１３．５４　ｇ／ｍｌ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｄｒｕｇ　ｈａｄ　ｎｏ　ｉｎｌｆｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｖｉｕｒｓ　ａｎｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｆｒｏｍ　ｔｌｌｅ　ｃｅｌ１．ｈｏｗｅｖｅｒ．ｉｔ　ｈａｄ　ｉｌｆｎｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｖｉｒｕｓ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｃａｕ．　ｄｅｘ　ｏｆ　Ｕｎｄａｒ／ａ　ｐｉｎｎａｔｆｉｄａｈａｓ　ｈａｓ　ｃｏｎｓｐｉｃｕｏｕｓ　ａｎｔｉ—Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　１　ｖｉｕｒｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｈａｐｐｅｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ，ａｂ・　ｓｏｒｐｔｉｎｇ　ｓｔａｇｅ　ｏｆ　ＨＳＶ一１　ｒｅｌｅａｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｖｅｒｏ　ｃｅｌ１．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｈｅ　ｃａｕｄｅｘ　ｏｆ　Ｕｎｄａｒｉａ　ｐｉｎｎａｔｆｉｄａ；ＣＰＥ；ＭＴＩ＂ｔｅｓｔ；Ｐｌａｑｕｅ　ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｉｏ　人类单纯疱疹病毒１型（Ｈｅｐｒｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　１　ｖｉｕｒｓ，ＨＳＶ一１）可　收稿日期￣２００７－０４－２０；　修订日期：２００７－０９－２１　引起唇疱疹、疱疹性角膜结膜炎和新生儿脑炎等多种疾病，艾滋　基金项目：广东省自然科学基金团队项目（Ｎｏ．２００４Ｅ０３９２１３）；　病、癌症和器官移植等免疫低下者感染ＨＳＶ一１的危险性大大增　广州市科技攻关计划项目（Ｎｏ．２００５Ｚ３一Ｅ０４１１）　加。ＨＳＶ一１感染所导致的疤痕化，已成为发达国家失明的主要　作者简介：郝静（１９８１－），女（汉族），河北保定人，现为暨南大学生物医药研　原因。而目前临床常用的治疗药物主要是无环鸟苷（ＡＣＶ）等核　究开发基地２Ｏ０５级硕士研究生，学士学住，主要从事抗病毒药物研究工作．　苷类，其作用靶点是病毒ＤＮＡ聚合酶，进而影响病毒的复制，但　‘通讯作者简介：王一飞（１９６３一），男（汉族），河南郑州人，现任暨南大学生　其毒性大，加之容易产生耐药性、抗病毒谱窄且价格高昂，故筛选　命健康学院教授，博士生导师，博士学住，主要从事新药药理研究工作．　研制毒性小，作用机理不同的抗病毒药物尤为重要。　・８０６・