高效液相色谱法测定烯草酮合成废液中4-二甲氨基吡啶含量

第２７卷第２期　化学研究与应用　Ｖｏ１．２７．Ｎｏ．２　２０１５年２月　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｆｅｂ．，２０１５　文章编号：１００４—１６５６（２０１５）０２．０２３７￣４　．＿＿＿Ｉ．＿＿　Ｃｊ　同　效液相色谱法测定烯草酮合成　废液中４一二甲氨基吡啶含量　范小振　，张小杰　，徐宝军　（１．沧州Ｉ师范学院化学与环境科学系，河北沧州０６１００１；　２．河北省绿色农药中试基地，河北沧州０６１０２１）　摘要：采用高效液相色谱法测定烯草酮合成废液中４．二　氨基吡啶含量，使用ＢＤＳ　Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃ１８不锈钢柱　（２５０ｍｍｘ４．６ｍｍ），以甲醇：水：磷酸＝６０：３９．７５：０．２５为流动相，使用紫外检测器，在波长２５４ｎｍ下进行测定。　实验测定４．二甲氨基吡啶加标回收率为９７．７％，变异系数为３．３３％，线性相关系数为０．９９９４。　关键词：４－二甲氨基吡啶；萃取；高效液相色谱；测定　中图分类号：０６５７．７２　文献标志码：Ａ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　４－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｗａｓｔｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｏｆ　ｃｌｅｔｈｏｄｉｍ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ＦＡＮ　Ｘｉａｏ—ｚｈｅｎ　＇　，ＺＨＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｊｉｅ　，ＸＵ　Ｂａｏ－ｊｕｎ　（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｃａｎｇｚｈｏｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃａｎｇｚｈｏｕ　０６１００１，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｍｅｄｉｕｍ　Ｔｅｓｔ　Ｂａｓｅ　ｏｆ　Ｇｒｅｅｎ　Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ　ｏｆ　Ｈｅｂｅｉ，Ｃａｎｇｚｈｏｕ　０６１０２１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　４－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｗａｓｔｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｏｆ　ｃｌｅｔｈｏｄｉｍ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ，ｕｓｉｎｇ　ｏｆ　ＢＤＳ　Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃ１８　ｓｔａｉｎｌｅｓｓ　ｓｔｅｅｌ　ｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍｘ４．６ｒａｍ）ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈａｎｏ１．ｗａｔｅｒ－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：６０：３９．７５：Ｏ．２５　ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ａｎｄ　ＵＶ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｔ　２５４ｎｍ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　４－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　ｒｅｃｏｖｅｙｒ　ｉｓ　９７．７％，ＲＳＤ（ｎ＝６）ｆｏｒ　４－　ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　ｉｓ　３．３３％．Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｆｃｉｅｎｔ　ｉｓ　０．９９９４．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：４－ｄｉｍｅｔｈｙ１ａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ；ｅｘｔｒａｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　４一二甲氨基吡啶（ＤＭＡＰ）是近年来广泛用于　应收率高，产品纯度高等特点　，成为酰化反应　化学合成的新型高效酰化催化剂…，与传统的酰　的“超级催化剂”。但由于催化剂用量大，造成了　化催化剂相比，其具有催化效果显著，反应速度　催化剂的大量消耗，因此必须考虑催化剂的回收　快，反应温度低，条件温和，易控制，操作方便，反　循环使用　。为了定量回收，提高催化剂回收率，　收稿日期：２０１４－０７－０７；修回日期：２０１４—１０一ｌ１　联系人简介：范小振（１９６６．），男，教授，主要从事环境分析和农药分析研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｆｘｚ０３１５＠１２６．ｅｏｍ　２３８　化学研究与应用　第２７卷　本文建立了高效液相色谱法测定烯草酮合成废液　１）。　中４．二甲氨基吡啶含量的方法。废酸液用碱中和　使催化剂从水相中游离出来，以二氯甲烷作为有　机萃取剂萃取出４．二甲氨基毗啶，采用高效液相　色谱法进行含量的测定。　１　实验部分　２　４　５　６　，　保留时间／ｒａｉｎ　１．１仪器与试剂　图１　４一二甲氨基吡啶色谱图　高效液相色谱仪（Ａｇｉｌｅｎｔ　１２６０），紫外检ｉ９１４器；　Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｃｈｒｏｍａｔｏ￣ａｍ　ｏｆ　４一ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　色谱柱：ＢＤＳ　Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃ１８（２５０　ｍｍ×４．６ｒａｍ，　１：４－二甲氨基吡啶　５１ｘｍ）。　４一二甲氨基吡啶标准样品（已知含量：≥　１．３．４计算　将测得的两针试样溶液及前后两　９９．０％）；试样：烯草酮合成后的废酸液样品；甲醇　针标样溶液的峰面积分别进行平均，以质量浓度　（色谱纯）；水为新蒸二次蒸馏水；二氯甲烷，稀硫　表示的试样中４一二甲氨基吡啶有效成分含量，按　酸，氢氧化钠溶液，磷酸均为分析纯。　下式以计算：　１．２色谱条件　Ａ　ｘＰｃ：２ｘＭｔＵ一　——＿．　—×１００Ｏ　＾…ｖ　ＡＩ　流动相流量１．０　ｍＬ・ｍｉｎ～；柱温为室温；流动　式中：　相：甲醇：水：磷酸＝６０：３９．７５：０．２５；检测波长　Ｃ～试样中４一二甲氨基吡啶的质量浓度，单位　２５４ｎｍ；进样体积５　Ｌ；４一二甲氨基吡啶保留时间　为ｇ・Ｌ～；Ａ。一标样溶液中４一二甲氨基吡啶峰面积　３．３１７ｍｉｎ。　的平均值；Ａ　一试样溶液中４一二甲氨基吡啶峰面　１．３分析步骤　积的平均值；Ｍ　一标样中４．二甲氨基吡啶标样的　１．３．１　标准溶液的配制　准确称取４一二甲氨基　质量，单位为ｇ；Ｐ一标样中４－二甲氨基吡啶标样的　吡啶（ＤＭＡＰ）Ｏ．０５ｇ（精确至０．０００２　ｇ），用少量二　质量分数，以％表示。　氯甲烷溶解并转人２５ｍＬ容量瓶中，用二氯甲烷稀　释至刻度，摇匀，配成４．二甲间氨基吡啶标准储备　２结果与讨论　液。　１．３．２试样溶液的配制　用移液管量取１ｍＬ废　２．１流动相的选择　酸液样品置于５０ｍＬ小烧杯中，逐滴加入氢氧化钠　考查了不同比例的甲醇：水：磷酸为８０：１９．７５　溶液，用精密ｐＨ试纸（８．２～１０．０）测定其ｐＨ值　：０．２５；７０：２９．７５：０．２５：６０：３９．７５：０．２５作为流动　约为８．８，加入５ｍＬ二氯甲烷置于超声波清洗器　相，发现当选用６０：３９．７５：０．２５为流动相时，保留　中振荡混合均匀，倒人分液漏斗中静置、分液，取　时间适宜，峰形规则，分离效果较好。最终确定甲　下层溶液，制成试样的萃取液。　醇：水：磷酸＝６０：３９．７５：０．２５作为流动相。　１．３．３测定在上述操作条件下，待仪器基线稳　２．２检测波长的选择　定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应　４一二甲氨基吡啶含有苯环在２３０～３００　ｎｍ有　值，待相邻两针的相对响应值变化小于２％，按照　中等强度的Ｂ吸收带，根据紫外吸收曲线（图２），　标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序　ＤＭＡＰ在波长２５４ｎｍ处有较强吸收，具有较高的　进行测定，４．二甲氨基吡啶高效液相色谱图（图　灵敏度，因此选择２５４ｎｍ作为检测波长。　第２期　范小振，等：高效液相色谱法测定烯草酮合成废液中４．二甲氨基吡啶含量　２３９　其线性回归方程为Ａ＝１７．８４１　Ｃ（ｔｘｇ・ｍＬ　）＋　４９３．７，线性相关系数为ｒ＝０．９９９４，满足定量分析　图２　４一二甲氨基吡啶紫外光谱图　Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ＵＶ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｏｆ　４一ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎ０ｐｙｒｉｄｉｎｅ　２．３取剂萃的选择及萃取效果的考查　根据４一二甲氨基吡啶的溶解情况，选择毒性　较小的二氯甲烷作为４．二甲氨基吡啶的有机萃取　剂，并用标准样品进行萃取实验，考查萃取效果。　准确称取０．０５ｇ　４一二甲氨基吡啶（ＤＭＡＰ）４份　（精确至０．０００２　ｇ），分别加入１ｍＬ稀硫酸使　ＤＭＡＰ成盐，再逐滴加入氢氧化钠溶液，使用精密　一∞．＞量ｖ０　旧　４　４　３　３　２　２　ｌ　ｐＨ试纸（８．２—１０．０）测定其ｐＨ值约为８．８，加入　５　Ｏ　５　Ｏ　５　Ｏ　５　Ｏ　５　Ｏ　Ｏ　０　０　０　Ｏ　Ｏ　Ｏ　Ｏ　Ｏ　０　０　０　Ｏ　０　Ｏ　Ｏ　Ｏ　０　５ｍＬ二氯甲烷置于超声波清洗器中振荡混合均　匀，倒入分液漏斗中静置、分液，取下层溶液，制成　标样的萃取液，按已确定的色谱条件进行测定（见　表１）。测定结果表明，存在于有机相当中的４一二　甲氨基吡啶已基本萃取完全，标样的萃取回收率　为９７．５％一１０２．４％平均回收率为９９．３％，萃取效　果较好。　表１标样萃取效果测定　Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓａｍｐｌｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　序号标样量／ｍｇ实测量／ｍｇ回收率／％平均回收率／％　２．４方法线性相关性试验　用微量注射器分别量取上述４．二甲氨基吡啶　标准储备液５０　、ＩＯ０￣Ｌ、２５０ＩＬＬ、４００Ｉ．ＬＬ、５００￣Ｌ　于５个ｌＯｍＬ容量瓶中，用二氯甲烷定容至刻度，　摇匀，制成标准系列。按已确定的色谱条件分别　进行分析，测量４一二甲氨基吡啶的峰面积，取３次　测定的平均结果。以４．二甲氨基吡啶标准样品质　量浓度（Ｃ）为横坐标，峰面积（Ａ）为纵坐标绘制标　准曲线（见图２）。结果表明，４．二甲氨基吡啶的含　量与其相应的峰面积之间呈现较好的线性关系，　的要求。　图３　４一二氨基吡啶标准曲线　Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　４－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　２．５方法精密度试验　选择一个有代表性的样品溶液，在已确定色　谱条件下平行测定６次，计算４一二甲氨基吡啶的　峰面积的平均值、标准偏差和相对标准偏差。结　果表明，４一二甲氨基吡啶的变异系数为３．３３％，如　表２所示，可见该方法的精密度能满足定量分析　２　４　６的要求。　表２精密度测定结果　Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　序号　测定结果／Ｉ．Ｌｇ・ｍＬ一　～５　８　８　２　８　３　９　４　５　５　３　差３　兰　２．６样品含量测定　用微量注射器量取１Ｏ０１ｘＬ上述４一二甲氨基吡　啶试样的萃取液于ｌＯｍＬ容量瓶，用二氯甲烷定　容，摇匀。从中吸取取２ｍＬ，再用二氯甲烷稀释至　１０ｍＬ，按已确定的色谱条件进行测定，测量４一二甲　氨基吡啶的峰面积，计算废酸液中４一二甲氨基吡　啶的含量为１６９．７０　ｇ・Ｌ～。　２．７方法准确度试验　准确称取０．０２５ｇ　４一二甲氨基吡啶标样４份　（精确至０．０００２ｇ），分别加入０．５ｍＬ废酸液样品，　一　：　３　～４　２４０　化学研究与应用　第２７卷　滴加氢氧化钠溶液至上述ｐＨ值，加入５ｍＬ二氯　果表明，４一二甲氨基吡啶的加标回收率在９６．Ｏ％　甲烷进行萃取，制成加标后的萃取液，按已确定的　一９９．６％之间，平均回收率为９７．７％。　色谱条件进行测定进行回收率测定（见表３）。结　表３　加标回收率测定结果　Ｔａｂｌｅ　３　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　合成废液中４＿－－＂Ｉ￣氨基吡啶的含量，方法简单、快　３　结　论　速、准确度高、精密度好，且经济、低毒，能客观准　确地反映产品质量，可作为４－二甲氨基吡啶含量　本实验采用反相高效液相色谱法测定烯草酮　的测定方法，应用于生产、回收过程的质量检测。　参考文献：　［１］廖联安，李正名．４一二甲氨基吡啶催化硫代磷酰化反　（１２）：７９９—８０１．　应及其在有机磷杀虫剂合成中的应用［Ｊ］．化］　进展，　［３］许友．水杨酸甲酯的合成新方法［Ｊ］．精细石油化：【：进　１９９８，（３）：４３．４５．　展合成化学，２０１０，１１（４）：４２＿４３，５１．　［２］陈洪，谢建英，黄思庆．有抗病毒活性的苯并咪唑苯氧　［４］龚行，阳年发，杨利文，等．ＤＭＡＰ循环催化Ｂａｙｌｉｓ—ｈｉｌｌ－　乙酸乳糖酯的催化合成［Ｊ］．化学研究与应用，２００５，１７　ｍａｎ反应的研究［Ｊ］．化学试剂，２００５，２７（７）：３９２－３９４．　（责任编辑李方）