酸解法测定淀粉
方法1 1.将除去可溶性糖的残渣用80%乙醇洗入50ml三角瓶(3次重复),水浴或100~105度烘箱加热2~3小时,10%NaOH中和至微碱性(1滴甲基红指示剂,变黄),转入100ml容量瓶,慢慢加入5%ZnSO4和0.15mol*l-1Ba(OH)25ml至产生白色沉淀,加水到刻度,混匀过滤,滤液备用。
2.测定:吸取滤液6ml,加斐林试剂4ml混匀加塞,于沸水浴中加热15分钟,取出后流水冷却,再经1500转离心5分钟,收集上清液,在590nm波长处比色 。
3. 标准曲线的绘制:取干洁试管7支,依次加入葡萄糖标准液(100μg/ml)0、1、2、3、4、5、6ml和蒸馏水6、5、4、3、2、1、0ml,加斐林试剂4ml混匀加塞,于沸水浴中加热15分钟,取出后流水冷却,再经1500转离心5分钟,收集上清液,在590nm波长处比色 。
斐林试剂:A液—(CuSO4*5H2O)40克后蒸馏水定容1000ml,B液—酒石酸钾钠(KNaC4O6*4H2O)200克与NaOH150克后蒸馏水定容1000ml;最后将A液B液等体积混匀。
葡萄糖标准液:80度烘干葡萄糖0.1000克蒸馏水定容100ml,浓度为1mg*ml-1。
滴甲基红指示剂:0.2克溶于少量酒精后蒸馏水定容100ml
方法2. 1. 1.将除去可溶性糖的残渣用1当量HCl15ml洗入150ml三角瓶(3次重复),摇匀后100~105度烘箱加热2~3小时,冷却蒸馏水定容100ml 过滤加
10%NaOH6 ml中和
2. 测定:取滤液1ml(空白中用1毫升蒸馏水代替)加入蒽酮试剂5毫升,摇匀,于沸水浴中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色 。
1当量HCl:43 mlHCl蒸馏水定容500ml
3、标准曲线的绘制:取干洁试管6支,依次加入葡萄糖标准液(100μg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml和蒸馏水1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0ml,再分别加入蒽酮试剂5毫升,于沸水浴中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色,记录OD值,绘出标准曲线。
4、计算:C=AN*0.9/W
C—样品总糖含量(μg/g) W—样品重量(g)
A—标准曲线查得的糖量(μg) N—样品提取液占样品反应液的倍数
推荐干重0.5~1克鲜重1~2克或参考参考书
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