1.目的
规范VITEK2 COMPACT全自动鉴定药敏分析仪的操作规程，确保微生物鉴定药敏分析的准确性。
2.授权操作人
经培训并通过考核的检验科微生物检验实验室工作人员。
3.工作原理
细菌理化性质不同，分解底物导致PH改变而产生不同颜色。经光电比色法测定来判断反应结果，不同种类的鉴定卡上有不同数量和类别的生化反应，采用连续检测法，每隔一段时间仪器会自动判读结果，最后结合仪器内部微生物数据库得出鉴定及药敏结果。
4.工作环境
相对湿度:20%-80%无凝集水;室温:15-30度，避免日光直射。
5.操作程序 5.1卡片选择 5.1.1鉴定卡
GN 革兰阴性杆菌鉴定卡 GP 革兰阳性菌鉴定卡
NH 奈瑟菌嗜血杆菌鉴定卡 YST 酵母菌鉴定卡 ANC 厌氧菌鉴定卡 5.1.2 药敏卡
AST-GN 革兰阴性菌药敏卡 AST-GP 革兰阳性菌药敏卡 AST-YST 真菌药敏卡 5.2 菌悬液配置及稀释
5.2.1悬浮液：0.45% NaCL液，PH 4.5-7.2 5.2.2.菌悬液浓度 ： 鉴定卡
GN 0.5 - 0.63 麦氏单位
GP 0.5 - 0.63 麦氏单位 NH 2.7 - 3.3 麦氏单位
YST 1.8 - 2.2 麦氏单位
ANC 2.7-3.3 麦氏单位 药敏卡 AST-GN 3.0ml 盐水 + 145µl 0.5 –0.63 麦氏单位菌悬液
AST-GP 3.0ml 盐水 + 280µl 0.5 –0.63 麦氏
单位菌悬液
AST-YST 3.0ml 盐水 + 280µl 1.8 –2.2 麦氏单位菌悬液
5.2.3药敏卡稀释方法
- 按上述浓度手工进行稀释
VITEK 2 COMPACT上机前的细菌培养要求(表一) 菌 种 接种物的浊度 卡 片 培 养 要 求 培养基TSAB/CBA/MAC ，革兰阴性杆菌 GN AST-GN 35-37℃，需氧，无CO2，培养 18-24 小时 使用TSAB/CBA上的菌落。35-37℃需氧培养 革兰阳性菌 GP AST-GP 18-24小时， 链球菌: 5-10% CO2 葡萄球菌: 无CO2 使用酵母菌 1.8-2.2 McF YST AST-YST SDA/TSAB/CHBA/CBA/TSA/CPS ID3，35-37℃ 需氧培养18-72 小时, 无0.5-0.63 McF 0.5-0.63 McF CO2 奈瑟菌 嗜血杆菌 弯曲菌 其他苛养菌 厌氧菌 棒状杆菌 2.7-3.3 McF ANC 2.7-3.3 McF NH 弯曲菌：TSAB,35-37℃微需氧培养18-24小时 其他苛养菌：CHOC,CHOC PVX 5-10% CO2, 35-37℃需氧培养18-24小时 棒状杆菌：使用CBA/CAN/TSAB/TSAHB上的菌落, 35-37℃ CO2,或非CO2,培养18-24小时 厌氧菌：使用CBA/CDC/BRU/CHBA/TSAB/TSAHB上的菌落, 35-37℃ 厌氧培养18-72小时 注：
TSA： 胰酶大豆琼脂
TSAB：胰酶大豆琼脂+5%羊血 CBA： 哥伦比亚羊血琼脂
CHBA：哥伦比亚马血琼脂
MAC： 麦康凯琼脂
CPS ID 3：尿标本产色鉴定平板 SDA： 沙保弱葡萄糖琼脂 CAN: 哥伦比亚CAN琼脂+5%羊血 CDC: CDC厌氧琼脂+5%羊血
BRU: Brucella布氏琼脂+5%羊血，血红素，维生素K 5.3操作流程
5.3.1 18-24小时分纯细菌（新鲜菌）； 5.3.2根据细菌选卡片（参照表一）；
5.3.3使用前将卡片和盐水瓶从冰箱取出，放室温15-20分钟，充分复温 ；
5.3.4在载卡架上放一次性塑料试管（注意：必须使用厂家配套提供的塑料管），每管中加入3ml 0.45% NaCl溶液； 5.3.5用比浊仪校正管（Ref 93059）校正比浊仪，测定的数值应在规定范围内；
5.3.6按表一建议配制菌悬液，并用比浊仪测定菌液浓度；如同时做药敏试验时，应按二（2）建议进行稀释并混匀； 5.3.7将卡片按顺序放在载卡架上，输样管插入到菌液管中。药敏卡应放在配对鉴定卡的后面；
5.3.8进入VITEK 2 COMPACT应用软件主界面。扫描载卡架条码（或直接选取卡架号）。扫描试卡条码，将鉴定
试卡与药敏试卡链接，并输入标本信息。 如图所示：
1)进入主菜单，如左图：
2）点击
3)点击 ， ，出现以下窗口
载卡架信息：可以用条码扫描器输入也可自下拉菜单选择
4）扫描试卡
，进入试卡编辑菜单，出现下图窗口
5）选中属于同一菌株的所有实验卡，点击 按钮，出现如下窗口
输入实验号和菌株编号
点击
点击 保存
5.3.9将载卡架放入仪器的填充仓，按“充入”，右填充完毕。
70秒左填充完毕后，仪器的蓝色指示灯闪亮。将载卡架取出并放入装载仓。仪器自动扫描条码，审核所有输入的卡片信息是否正确，确认无误后自动进行封口和上卡。操作完成后，仪器口的蓝色箭头闪亮提示。 如图：
1） 2） 3） 4）
5.3.10在仪器运行过程中，可以进行病人信息的输入，点击
，出现以下窗口：
按栏目提示，编辑好病人信息并保
存。
5.3.11仪器每隔15分钟自动阅读孵育仓内所有卡片，并将数据传入英文工作电脑，电脑分析所有数据并给予结果，确认无误结果可传至中文电脑，由操作者认可并发放临床报告；
5.3.12已完成的卡片由仪器自动卸载入废卡箱。 6．结果处理
6.1浏览结果
从主菜单敲击 图标，出现以下窗口，点击屏幕左列的相应编号，可见：
ID结果 AST结果
下图为“结果处理流程图”
未完成结果 需补充信息 需浏览 需审核确认 完成
需菌株信息 实验室操作者确认分
离株信息 上级操作者确认分离株信息
并
点
击
“review” 并点击“approve”
AES提示信息；
在药敏结果右上方显示，见右图标示：
点击专家系统按钮
，可见如下图，可利用下拉箭头浏览
不同类别抗生素的耐药机制：
6.2 鉴定结果
6.2.1鉴定卡的结果：一般仅给出单一结果，无需进行补充试验，电脑主机VITEK 2 COMPACT程序浏览结果时，可给出结果的可信度评估。单一良好结果可直接传输到数据库（设置选择为Enabling Long-Term Data Storage）和中文软件中并长期储存；
6.2.2如果给出两个及两个以上结果，仪器会做出提示或要求进行补充试验，请按注释进行补充试验，选择正确的鉴定结果，并将结果传输；
6.2.3不能鉴定或无法确定的结果，请查找原始分离平板，确认所分离细菌是否为纯培养，必要时重新分离并重新进行鉴定试验。
6.3 药敏结果
6.3.1如果同时进行鉴定和药敏试验，细菌鉴定结果会自动加到药敏卡上；否则需手工添加细菌名称到药敏卡信息中；
6.3.2如果有专家系统评语出现，则应按操作规程对药敏结果作适当的修改并确认最终结果；
6.3.3如果有浏览信息出现，应按程序处理浏览信息并确认最终结果；
6.3.4上述步骤处理完毕，结果会自动传输到LSN数据
库中。
7. 质量控制
7.1在“ Manage QC results”菜单, 点击图标
7.2输入或扫描卡片批号
7.3进行批号维护：输入接收的数量及日期等
7.4按照一般上卡程序上卡，扫描试卡后，在对试卡进行维护时，选择为质控卡；
7.5试验结束后点击图标 查看质控结果；
7.6如需删除某QC结果，选择需删除的结果，点垃圾筒
图标。
8. 维护保养 8.1清洁废卡槽
打开废卡收集器舱口，取出废卡收集器将所有卡片倒入废物处理槽，10％漂白液清洗垃圾槽，放回舱内。
8.2清洁填充仓
打开舱门，用10％漂白液清洁舱门 8.3清洁光学读头(在无测试卡的前提下) 打开孵育器，拔出读数头，用擦镜纸清洁
8.4清洁孵育转盘Carousel
试卡架分为四个部分。清洗前，应确认卡架内已没有待处理的试卡。
8.4.1进入卡架清洗程序：Main
Menu>Utilities>Maintenance>Cleaning>Carousel Cleaning;
8.4.2点击continue，仪器显示”Remove the incubactor access cover now”；
8.4.3仪器显示“Preparing for section Removal”； 8.4.4按仪器提示，依次序卸出四个试卡架，并将孵育架进入盖盖回。消毒清洁并干燥孵育架(10％漂白液清洗并浸泡5分钟，勿高温, T<85C)后，重新放回读数孵育箱内。
8.4.5再次启动孵育架清洗程序Main
Menu>Utilities>Maintenance>Cleaning>Carousel Cleaning， 此时仪器显示Preparing for section replacement；
8.4.6按程序提示依次装回所有卡架，盖好孵育架进入盖；
8.5清洁载卡架cassettes： 8.5.1取下条形码；
8.5.2剩余船体用10％漂白液清洗并浸泡5分钟，风干； 8.5.3装回条形码。
9．注意事项
9.1 菌悬液配制过程中，一定要将细菌菌落研磨细致，否则卡片在洗液过程中可能会堵孔；
9.2 正常运行或者空闲状态下不能打开装载仓的仓门。
参考文献
[1] VITEK2 Compact全自动鉴定药敏分析仪配套使用说明书
[2]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31：2007医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2007
[3]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189:2007）.2008
编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：
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