一 空气监测布点法:
①室内面积≤30cm2,设内外中三个点;室内面积>30 cm2设5个点
②用直径9 cm的琼脂平板分别于上述布点位置,采样时将平板打开,扣于平板旁,暴露时间为5分钟,盖好立即送检.
③平板置35-37度48小时培养
④计算公式:细菌总数cfu/m3=50000N/A为平板面积,T为平板暴露时间,N为平均菌落数 即:菌落数/平板数换算系数
换算系数直径9 cm平板 5分钟157; 10分钟78; 15分钟52; 30分钟26 手术室报告方式: 个/30min ø90 二 医务人员手监测
①手的采样:被检人五指并拢,用生理盐水浸湿棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次一只手涂面积约为30 cm2,剪去操作者手触部位,将拭子放入10ml洗脱液中
②细菌总数监测:将采样管用力振打80次,用无菌管吸取1ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数. 计算:细菌总数cfu/ cm2=平板上菌落数稀释倍数/60 cm2 结果判定: 环境类别 Ⅰ类层流洁净室 空气cfu/ cm 物表cfu/ cm 医务人员手cfu/ cm ≤10 ≤5 ≤5 ≤5 ≤5 322Ⅱ类区域普通手术室\\产房\\婴儿室≤200 \\人工肾\\烧伤科\\重症监护 Ⅲ类儿科\\注射室换药室等 Ⅳ类传染科及病房 ≤500 - ≤10 ≤15 ≤10 ≤15 注意: ①不得检出乙型链球菌\\金黄色葡萄球菌\\及其它致病菌
②母婴同室,婴儿室,新生儿室及儿科病房的工作人员手上不得检出沙门氏菌\\铜绿\\金葡.
三 物表监测
采样:用55 cm2的方框取样4个不同位置,其余方法同手表检测 细菌总数及其他方法无同手表检测
计算: 细菌总数cfu/cm2=平板上菌落数稀释倍数/采样面积cm2 结果判定:同手表
四A一次性物品无菌:取5-10套样品用洗脱液洗脱后,各吸取接种于平板,35-37度培养3-5天,不得检出细菌.
B无菌物品:取供试品2个包装,拆开后于不同部位剪取约1cm3cm的样品放入增菌液,如果有菌生长,转平板.不得检出细菌
五 消毒剂:吸取1ml正在使用中的消毒剂加入9ml肉汤中含有相应中和剂振80次后吸入于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数. 报告:cfu/ml
结果判定:<100 cfu/ml
六 透析水:1.取透析水1ml于无菌平皿,加入56度琼脂,冷却后于37度48小时作细菌总数计数. 结果判定:出口水<200 cfu/ml 入口水<200 cfu/ml 报告:cfu/ml
注:氧气湿化瓶液监测同上, 结果判定:<1000 cfu/ml,不得检出致病菌 克氏双糖培基
配制方法: 取克氏双糖商品化干粉培基 55g,加入装有1000ml蒸溜水的三角烧瓶中,加热溶解, 调, 分装小试管约, 12磅 15分钟灭菌; Ｖ－Ｐ培养基:
成份：酵母浸肉膏, 胰蛋白胨, 大豆蛋白胨, 葡萄糖, , 蒸溜水200ml 制法： 将上述成份加热溶解, 调, 分装小试管, 10P 15’高压灭菌; VP试剂:
成份：甲液:α-奈酚6 g 乙醇100ml 乙液:40%氢氧化钾 靛基质培基:
成份：牛肉膏, 胰蛋白胨6g, 盐酸胱氨酸L-半胱氨酸, 琼脂,硫代硫酸钠： 蒸溜水200ml
制法： 将上述成份加热溶解, 调, 分装小试管, 15磅15分钟高压灭菌; 硝酸盐培基
成份：硝酸钾KON3 , 优质蛋白胨, 蒸溜水200ml
制法：将上述成份加热溶解, 调, 分装小试管, 10P 20’高压灭菌; 碱性蛋白胨水
成份：蛋白胨10 g,氯化钠 g,H2O500ml 混合溶解,调节,高压15分钟灭菌 血液保养液
成份：枸橼酸 g; 枸橼酸钠 g;葡萄糖:克 蒸馏水100ml 每25ml可使100ml血保养 复方中和剂
成份：吐温80%+卵磷脂1-2%+硫代硫酸钠
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容