Elisa 相关试剂的配制
2012年
1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
NaH2PO4·2H2O 0.39克
Na2HPO4 1.27克
NaCl 0.85克
NaN3 200 mg
H2O(蒸馏水) 至 1000ml
2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液PH7.4,PBST
NaCl 2.0克
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
KCl 0.2克
NaN3 0.2克
H2O 至 1000ml
吐温(Tween)20 0.5ml
4°C保存备用
3、包被液(简称CB)pH9.6
Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
NaN3 0.2克
H2O 至 1000ml
密封盖好,4°C存放备用
4、ELISA底物液(可溶性底物)
磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.0
0.1mol/L柠檬酸(21.014克/100ml) 24.3ml
0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml) 25.7ml
H2O 50ml
4°C存放备用
5、DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)
0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL
Tris 6.05克
HCL(36%) 3.15克(约2.7ml浓HCL)
H2O 至 1000ml
DAB为3´,3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色
5. 偶联稀释剂 和 稳定缓冲液
HRP偶联稳定剂
无论蛋白稀释度的高低,HRP-StabilPLUS 都可以提供稳定的HRP 偶联蛋白质。该稳定剂可防止过氧化物酶活性的损失,并能维持蛋白的构造。
HRP-StabilPLUS 提供预先稀释的即用酶偶联物,消除诊断公司在溶解或稀释偶联物
浓缩品过程中的错误机会,以改善天间变异。
HRP-StabilPLUS 是一种TRIS缓冲液,含有专利稳定成分,看起来有些浑浊。HRP-StabilPLUS是您经济可靠的选择,且不含BSA。
抗体稀释液和强化剂
抗体强化剂 在免疫测定中用于稀释浓缩抗体和抗体偶联物:
不含多克隆和单克隆抗体
HRP 偶联抗体
AP 偶联抗体
荧光偶联抗体
增强信号建议使用 抗体强化剂 以获得高信噪比结果。缓冲液使特异抗体的活性增强 40 - 60%,但没有增加非特异性结合。你也可通过进一步稀释偶联物,直至获得同样信号来降低生产成本。另外,在抗原或血清的稀释中,也能得到极好的结果。
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