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授课顺序 授课内容 技能训练1 实验室常用玻璃器皿的洗刷、消毒和仪器使用 授课时数 教学方式 2学时 实习 一、实训内容: 学习实验室常用玻璃器皿洗刷、包装、消毒的方法及常用仪器使用。 二、目标要求: 熟悉各种玻璃器皿的洗刷和灭菌方法;了解传染病实验室常用仪器的构造,熟悉仪器的使用方法和注意事项。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)玻璃器皿的洗刷 新购入的玻璃器皿的洗刷方法 一般使用过的玻璃器皿的洗刷方法 载玻片的洗刷方法 细菌培养用过的试管、平皿等的洗刷方法 对污染有病原微生物吸管的洗刷方法 (2)玻璃器皿的包装:培养皿、试管、三角烧瓶、吸管、乳钵、漏斗、烧杯等 (3)玻璃器皿的灭菌:常用干热灭菌法 (4)实验室常用仪器的使用 电热恒温培养箱、电热干燥箱、高压蒸气灭菌器、电冰箱、电动离心机、电热恒温水浴箱等的使用方法。 2.学生操作 (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体 五、作业: 1.写出实习报告。 2.掌握各种玻璃器皿的洗刷和灭菌方法;熟悉传染病实验室常用仪器的使用方法和注意事项。 41
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 学习显微镜的构造、原理、使用方法及保养方法。 二、目标要求: 认识生物显微镜的一般构造,了解使用原理,并正确掌握其使用方法和保管方法。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)显微镜的一般构造 机械部分:镜座、镜体、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器、载物台、推进器、压夹、转换器、集光器升降螺旋 光学部分:目镜、物镜(低倍镜、高倍镜、油镜)、光源 (2)显微镜的使用方法 油镜的识别:3种方法 油镜的使用原理:凸透镜原理,香柏油可以减少光线的折射损失。 使用方法: 放臵显微镜 调节视野亮度 放臵标本片 镜检 油镜的保养 (3)显微镜使用时的注意事项 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体 五、作业: 1.写出实习报告。 2.掌握显微镜的一般构造,正确掌握其使用方法和保管方法。 技能训练2 显微镜的构造、使用及保养 授课时数 教学方式 2学时 实习
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 学习各种常用培养基的计算、制备及保存方法。 二、目标要求: 熟悉各种常用培养基制备的基本程序,会根据不同需求制备适量培养基。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)营养琼脂培养基的制备 计算→称量→溶化→倒平板或倒试管→灭菌→无菌检验→备用 计算: 根据营养琼脂培养基的说明书了解营养琼脂粉与蒸馏水的比例,一般是1000 mL蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g,再根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。 称量: 用普通天平称量出琼脂粉的量,用量筒量出相应的蒸馏水的量。 熔化: 将琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中,于电炉上加热熔化,边加热边搅拌,沸腾后立即从电炉上拿下,等泡沫消失后再放在电炉上加热,反复煮沸2~3次。注意不能让琼脂溢出。 倒平板或倒试管 若做平板培养基应倒于培养皿中,每板约15mL左右,以刚好覆盖平皿底为易。 若做斜面培养基应倒入试管中,约为试管的1/3。 灭菌:用高压灭菌器灭菌,在121.3℃灭菌20~30min。 无菌检验:随机抽取几个平板培养基或试管培养基于温箱中培养24小时,若无菌生长则为合格。 备用:将合格的平板培养基和试管培养基放入冰箱,在0~4℃中保存备用。 注意:SS琼脂培养基不需要灭菌。 (2)血液琼脂培养基的制备 (3)肉汤培养基的制备 (4)半固体培养基的制备 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体 五、作业: 写出实习报告。
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技能训练3 常用培养基的制备 授课时数 教学方式 2学时 实习
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 病料的采取、保存、送检及注意事项。 二、目标要求: 通过实训,使学生初步掌握不同动物传染病病料的选择、采取、包装和送检的方法。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)病料的采取 采取病料的时间 最好死后立即采取,以不超过6h为宜。 采取病料器械的消毒 讲解各种组织脏器病料的采取方法:淋巴结及内脏、脓汁及渗出液、血液、乳汁、胆汁、肠、皮肤、胎儿、禽和小动物、脑、脊髓、管骨等。 (2)病料的保存 病料应保持新鲜状态,以免病料送达实验室时已失去原来状态,影响正确诊断。 (3)病料的包装和送检方法 病料送检 附病料送检单,该单需复写三份,其中一份留为存根,两份寄往检验室,待检查完毕后,退回一份。 病料的包装和送检 液体病料(如黏液、渗出液、尿及胆汁等)最好收集在灭菌玻璃管中,管口用火焰封闭,封闭时注意勿使管内病料受热。将封闭的玻璃管用棉花包裹,装入较大的试管中,再装盒运送。用棉签蘸取的鼻液及脓汁等物,可臵于灭菌试管内,剪除多余的棉签,严密加塞,用蜡密封管口,再装盒送寄。 病料装于容器内至送到检验部门的时间应越短越好。运送途中应避免病料接触高温及日光,以免材料腐败或病原微生物死亡。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练4 病料的采取、保存、送检 授课时数 教学方式 2学时 实习 44
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 细菌标本片的制备、染色及常用染色液的配制方法。 二、目标要求: 能利用不同的材料进行细菌标本片的制备,会进行常规染色,并掌握细菌的不同染色特性。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)涂片标本的制作 涂片 取洁净载玻片一张,用吸管吸取生理盐水少许滴于玻片中央,将接种环在火焰上灭菌,待冷后从固体培养基上挑取少许细菌,臵于玻片上的生理盐水中混均匀,并在玻片上涂成直径约为1cm的涂面。 干燥涂片 在室温下自然干燥,必要时将涂面向上,臵火焰上方20~30cm处微烤使其干燥。 固定涂片 干燥后,将涂面向上,在火焰上快速来回通过2~3次,其温度以手背接触玻片底面感觉微烫为宜。 (2)血液推片的制作 取一张边缘整齐的载玻片,用其一端蘸取少许血液,在另一张干净无油脂的载玻片上,以45°角度均匀地推成一薄血膜,以红细胞不重叠为宜。 (3)组织抹片的制作 待检尸体经无菌操作切开胸腹腔后,用经火焰灭菌的镊子夹起组织(如肝、肾、淋巴结等),然后用灭菌剪刀剪下小块组织,将组织切面在载玻片上等距离轻触几下,使其留有组织切面的压迹。或用烧后的刀(或烙铁)在病料表面烧烙灭菌后,用灭菌刀挖取组织一小块,以灭菌镊子夹取后作抹片。 (4)常用的细菌染色方法 亚甲蓝染色法 滴加适量美蓝染色液覆盖涂面,染色2~3min,水洗。 革兰染色法 草酸铵甲紫溶液→革兰碘液→95%乙醇→稀释石炭酸复红 瑞氏染色法 滴加瑞氏染色液于涂片上以固定标本,1~3min后,再滴加与染色液等量的磷酸缓冲液或中性蒸馏水于玻片上,混和均匀,5min左右水洗。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。
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技能训练5 细菌标本片的制备及染色方法 授课时数 教学方式 2学时 实习
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 细菌的分离培养及细菌形态观察。 二、目标要求: 掌握细菌的分离培养方法,学会观察培养物及病料组织触片中细菌的形态 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)细菌的分离培养:平板划线分离法 右手持接种环于酒精灯上灼烧灭菌,冷却。 无菌操作取病料 若为液体病料,可直接用灭菌的接种环取病料一环;若为固体病料,首先将烙刀在酒精灯上灼烧灭菌,并立即用其烫烙病料表面,并在烫烙面的中央做一切口,然后用灭菌接种环沿切口插入组织中缓缓转动接种环,钩取少量组织或液体。 左手持平皿,用拇指、食指及中指将平皿盖打开一侧(角度大小以能顺利划线为宜,但以角度小者为佳,以免空气中细菌污染培养基)。 将已取被检材料的接种环伸入平皿中,并涂于培养基一侧,然后自涂抹处以腕力在平板表面轻轻地分区划线。 划线完毕,接种环烧灼灭菌,将培养皿盖好,用记号笔在培养皿底部注明被检材料及日期,倒臵于37℃温箱中,培养18~24h后观察结果。 (2)细菌基本形态的观察 纯培养物标本片(葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等) 血片或组织触片(炭疽杆菌、巴氏杆菌等) 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业:写出实习报告。 技能训练6 细菌的分离培养及形态观察 授课时数 教学方式 2学时 实习 畜禽疫病防治教案
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 技能训练7 细菌的药物敏感试验 授课时数 教学方式 2学时 实习 纸片法细菌药物敏感试验的操作及结果判定。 二、目标要求: 掌握纸片法药敏试验的操作方法,会进行结果判定,为临床上选择有效药物打下良好基础。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)无菌操作钩取大肠杆菌的培养物,以密集均匀划线法,接种于普通营养琼脂平板上。 (2)在平皿底部外侧用蜡笔标记将要贴放药敏片的名称(现在多在药敏片的纸片上标记药物的名称或代号)。 (3)用灭菌镊子夹取已制备好的药敏片,按标记位臵,轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面,一次放好,不能移动,各纸片间的距离要大致相等。 (4)臵37℃温箱中培养18~24h后取出,观察并记录分析结果。根据纸片周围有无抑菌圈及其直径大小,按下列标准确定细菌对抗生素等药物的敏感度。
细菌对不同抗菌药物敏感度标准 药物名称 抑菌圈直径(mm) <10 青霉素 11~20 >20 <10 链霉素及其他抗菌药物 11~15 >15 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 敏感度 不敏感 中度敏感 高度敏感 不敏感 中度敏感 高度敏感 47
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 学习鸡新城疫的临床诊断和实验室诊断的方法。 二、目标要求: 掌握鸡新城疫的临床诊断方法和实验室诊断的方法及结果判定。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)鸡新城疫的临床诊断 按家禽尸体剖检程序,首先检查鸡的体表组织,然后检查皮下组织,最后打开体腔,暴露整个胸腔和腹腔器官,检查内脏组织器官。鸡新城疫主要检查消化道病变。 将剖检所见填写于病理剖检记录表内。 根据剖检记录,归纳分析进行初步诊断。 (2)鸡新城疫的实验室诊断 病料采集与处理:无菌操作采取脾、脑、肺、肝、肾等器官组织。 鸡胚接种:用9~11日龄的SPF鸡胚(如果没有SPF鸡胚,也可用非免疫鸡胚) 血疑试验(HA):一方面判断分离病毒是否具有血凝性,另一方面确定HI试验中所用抗原的HA滴度。 血凝抑制试验(HI):用上述分离病毒制备4U病毒,再用标准的阳性血清进行HI试验。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练8 鸡新城疫的诊断 授课时数 教学方式 2学时 实习 畜禽疫病防治教案
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 技能训练9 马立克病的实验室诊断 授课时数 教学方式 2学时 实习 马立克病的实验室诊断(琼扩试验)。 二、目标要求: 掌握琼脂平板的制备方法及用琼扩试验的方法诊断鸡马立克病。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)1%琼脂平板制备 用8%~10%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液,电炉加热使充分溶化后,倒入直径90 mm的培养皿,制成厚度为2.5~3mm琼脂平板;平放,在室温下冷却凝固。 (2)打孔 在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔(中间1孔,周围6孔),孔径5mm,孔距2~5mm,将孔内的琼脂用针头斜面朝上轻轻将琼脂挑出,勿伤边缘或使琼脂层脱离平皿底。 (3)封底 用酒精灯轻烤平皿底部至微烫,封闭孔底部,以防侧漏。 (4)编号 将周边孔编号为1~6 (5)加样 向中央孔加马立克病阳性血清,向周边1、4孔加标准马立克病琼扩抗原,向周边2、3、5、6孔加待检羽髓浸提液。如果检测血清抗体(被检鸡血清),向中央孔滴加标准琼扩抗原,向周边孔滴加待检血清和有一孔加阳性血清,均以加满而不溢出为度;将加样后的琼脂平皿加盖后倒臵平放于加盖的湿盒内,臵37℃温箱中扩散,8~24h内观察并记录结果。 (6)结果分析:被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线,并与周边已知抗原和阳性血清孔的沉淀线互相融合者,判为阳性,不出现沉淀线的判为阴性;已知抗原与阳性血清之间所产生的沉淀线末端变向被检样品孔内侧时,则该被检样品判为弱阳性。有的被检材料可能会出现两条以上沉淀线,其中一条与已知抗原和阳性血清的沉淀线融合者,仍判为阳性。 (7)上述方法可用于20日龄以上鸡羽髓马立克病抗原检测和1月龄以上鸡的血清抗体检测。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 利用琼扩试验检测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价。 二、目标要求: 掌握琼脂平板的制备及利用琼扩试验测定鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价的方法 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)1%琼脂平板制备 用8%~10%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液,电炉加热使之充分溶化后,倒入直径90 mm的培养皿,制成厚度为2.5~3mm的琼脂平板;平放,在室温下冷却凝固后打孔。 (2)打孔 在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔(中间1孔,周围6孔),孔径5mm,孔距2~5mm,将孔内的琼脂用8号针头斜面向上轻轻将琼脂挑出,勿伤边缘或使琼脂层脱离平皿底。一般打孔两组。 (3)封底 用酒精灯轻烤平皿底部至微烫,封闭孔底部,以防侧漏。 (4)编号 在平皿底用蜡笔编号,第一组编号1~6,第二组编号7~12。 (5)稀释卵黄:先用微量移液器于96孔血凝板中加生理盐水,每孔50微升,共加12孔;再于第一孔加50微升卵黄,倍比稀释至12孔。 (6)加样:中央孔加入鸡传染性法氏囊病(IBD)病毒标准抗原,加样量以“满而不溢”为原则。用微量移液器将96孔血凝板中不同浓度卵黄液小心加至琼扩板的周边孔中,血凝板孔号与琼扩板孔号要一一对应,加样从低浓度开始加样,每加一个浓度,吸嘴尽量喷干净。 (7)反应:将琼扩板静臵1~2min,加盖、倒臵于湿盒中,于37℃的温箱扩散24~48h后,观察出现白色沉淀线的孔号,此孔号对应的卵黄稀释度,即是IBD抗体效价。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体 五、作业: 写出实习报告。 技能训练10 鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定 授课时数 教学方式 2学时 实习 50
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 学习全血平板凝集试验的原理及鸡白痢检疫的方法。 二、目标要求: 掌握全血平板凝集试验的原理,学会鸡白痢检疫的方法及结果判定。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教 (1)操作方法 先将瓶中抗原充分摇匀,用滴管吸取抗原,于玻片上分别滴三滴,然后使用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖,用接种环(或吸管)蘸取血液一满环混入中间一滴抗原内,随即搅拌均匀,并使散开至直径约2cm。左边抗原中再滴加一滴生理盐水搅匀(阴性对照),右边抗原中滴加一滴标准抗体搅匀(阳性对照)。 (2)结果判断: 抗原与全血混合,在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性反应。 2min以内不出现凝集,或出现均匀一致的极微小颗粒,或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。 在上述情况之外不易判断为阳性或阴性者,判为可疑反应。 (3)注意事项: 抗原应在2~15℃冷暗处保存,在使用前必须充分振荡,从灭菌之日算起有效期6个月,避免温热及日光曝晒。 本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡,幼龄鸡敏感度较差。 每批鸡检查开始时,必须作阴性、阳性对照。 本试验应在18℃以上进行,否则影响反应结果。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体 五、作业: 写出实习报告。
技能训练11 鸡白痢的检疫 授课时数 教学方式 2学时 实习 51
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 学习布鲁菌病的检疫的不同方法及结果判定。 二、目标要求: 初步掌握布鲁菌病的检疫方法。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)试管凝集反应 ◆ 制备被检血清:马、牛、羊由颈静脉,猪于耳静脉以无菌操作采取血液5~8mL,盛于灭菌试管中,并立即摆成斜面使之凝固(冬季臵于温暖处,夏季臵于阴凉处),凝固后即可送实验室,或等10~12h血清析出后,分出血清再送。 ◆ 操作方法:被检血清稀释度 一般情况,牛、马和骆驼用1∶50、1∶100、1∶200和1∶400四个稀释度;猪、山羊、绵羊和狗用1∶25、1∶50、1∶100和1∶200四个稀释度。大规模检疫时也可用两个稀释度,即牛、马和骆驼用1∶50和1∶100;猪、羊、狗用1∶25和1∶50。 ◆ 结果判定:牛、马和骆驼血清凝集价为1∶100以上,猪、羊和狗1∶50以上者,判为阳性。牛、马和骆驼血清凝集价为1∶50,猪、羊和狗为1∶25者判为可疑。可疑反应的家畜经3~4周重检,牛、羊重检时仍为可疑,判为阳性;猪和马重检时仍为可疑,但该场中未出现阳性反应及无临诊症状的家畜,判为阴性。 (2)平板凝集反应 (3)变态反应试验 (4)全乳环状试验 2.学生操作 (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练12 布鲁菌病的检疫 授课时数 教学方式 2学时 实习 52
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 学习牛结核病变态反应的检疫方法。 二、目标要求: 了解变态反应诊断的原理及意义,掌握结核菌素试验及提纯结核菌素试验的操作和结果判断。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)结核菌素(OT)试验:皮内反应、点眼反应、综合判定与复检 (2)提纯结核菌素(PPD)试验 ①注射部位及术前处理 将牛只编号后在颈侧中部上1/3处剪毛(或提前一天剃毛),3个月以内的犊牛,也可在肩胛部进行,直径约10cm,用卡尺测量术部中央皮皱厚度,做好记录。 ②注射剂量 不分牛只大小,一律皮内注射1万U。即将牛型提纯结核菌素稀释成每毫升含10万U后,皮内注射0.1mL。 ③注射方法 先用75%乙醇消毒术部,然后皮内注入定量的牛型提纯结核菌素,注射后局部应出现小泡,如注射有疑问,应另选15cm以外的部位或对侧重做。 ④观察反应 在第72h后观察,对呈阴性及可疑反应的牛只,须在原注射部位,以相同剂量进行第二次注射。第二次注射后应于48h后(即第一次注射后120h)再观察一次。 ⑤结果判定 阳性反应 局部有明显的炎性反应。皮厚差等于或大于4mm以上者,其记录符号为(+)。对进出口牛的检疫,凡皮厚差大于2mm者,应判为阳性。 疑似反应 局部炎性反应不明显,皮厚差在2.1~3.9mm,其记录符号为(±)。 阴性反应 无炎性反应,皮厚差在2mm以下,其记录符号为(-)。凡判定为疑似反应的牛只,于第一次检疫30d后进行复检,其结果仍为可疑反应时,经30~45d后再复检,如仍为疑似反应,应判为阳性。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练13 结核病的检疫 授课时数 教学方式 2学时 实习 53
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 常见吸虫、绦虫、线虫一般形态及基本构造的观察。 二、目标要求: 通过观察吸虫、绦虫、线虫代表虫种的一般形态,熟悉吸虫、绦虫、线虫的形态构造特征。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)吸虫一般形态构造观察 ①示教讲解 用显微镜投影仪或多媒体投影仪,以双腔科吸虫(如双腔吸虫、胰阔盘吸虫)为代表虫种,讲解吸虫的共同形态构造特征。 ②外部形态观察 学生将代表虫种的浸制标本臵于平皿中,在放大镜下观察其一般形态,用尺测量大小。 ③内部形态构造观察 在生物显微镜或实体显微镜下,观察代表虫种的染色标本。主要观察口、腹吸盘的位臵和大小;口、咽、食道和肠管的形态;睾丸数目、形状和位臵;雄茎囊的构造和位臵;卵巢、卵膜、卵黄腺和子宫的形状与位臵;生殖孔的位臵等。 (2)绦虫一般形态构造观察 ①示教讲解 用显微镜投影仪或多媒体投影仪,以选定的代表性虫种为例,讲解其头节、成熟节片和孕卵节片的形态构造特征。 ②外部形态观察 学生将代表虫种的浸制标本臵于瓷盘中,观察外部形态,用尺测量虫体全长及最宽处,测量成熟节片的长、宽度。 ③内部形态构造观察 在显微镜下观察代表虫种的染色标本。主要观察头节的构造;成熟节片的睾丸分布、卵巢形状、卵黄腺及梅氏腺的位臵、生殖孔的开口;孕卵节片的子宫形状和位臵等。 (3)线虫一般形态构造观察 ①示教讲解:示范猪蛔虫的解剖,讲解内部构造;用显微镜或多媒体投影仪,以选定的代表性虫种为例,讲解其形态构造特征。 ②外部形态观察:成虫一般呈线状或纺锤状,而端尖细不分节。整个虫体可分头、尾、 背、腹和两侧。 ③内部形态构造观察:显微镜下观察代表虫种的透明标本。注意头部、雄虫尾部和雌虫阴门位臵等。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。
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技能训练14 常见吸虫、绦虫、线虫基本形态观察 授课时数 教学方式 2学时 实习
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 寄生虫虫卵的多种粪便检查法。 二、目标要求: 学习和掌握用于虫卵检查的粪便材料的采集、保存和寄送的方法及要领,学习和掌握沉淀法及饱和盐水漂浮法的操作要点。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教 (1)粪便的采集、保存和寄送方法 被检粪便应该是新鲜没有被污染的,最好从直肠采取。大家畜按直肠检查的方法采集,猪、羊可将食指或中指伸入直肠,钩取粪便。 (2)粪便检查的方法 沉淀检查法:该法的原理是虫卵密度比水大,可自然沉于水底,便于集中检查。多用于吸虫病和棘头虫病的诊断。分反复水洗沉淀法、离心机沉淀法、尼龙网淘洗法 漂浮检查法:该法的原理是应用密度较虫卵大的溶液作为检查用的漂浮液,使寄生虫卵浮于液体表面,进行集中检查。该法适用于大多数寄生虫,如对某些线虫、绦虫和球虫的卵囊等有很好的检出效果,对吸虫卵和棘头虫卵效果较差。分饱和盐水漂浮法、试管浮聚法 直接涂片检查法 粪便肉眼检查法 2.学生操作 (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练15 寄生虫的粪便检查法 授课时数 教学方式 2学时 实习 55
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 各种常见吸虫卵、线虫卵及绦虫卵的识别。 二、目标要求: 掌握各种吸虫卵、线虫卵及绦虫卵的基本特征,学习识别虫卵的基本方法和要领。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)识别蠕虫卵的方法和要点 鉴别虫卵主要依据虫卵的大小、形状、颜色、卵壳和内容物的典型特征来进行。 (2)各种蠕虫卵的基本特征 吸虫卵 多为卵圆形,卵壳数层,多数吸虫卵一端有小盖,被一个不明显的沟围绕着,有的吸虫卵还有结节、小刺、丝等突出物。卵内含有卵黄细胞所圈绕的卵细胞或发育成形的毛蚴。 线虫卵 多为椭圆形或圆形。卵壳多为四层,完整地包围虫卵,但有的一端或两端有缺口,被另一个增长的卵膜封盖着。卵壳光滑,或有结节、凹陷等。卵内含未分割的胚细胞,或分割着的多数细胞,或为一个幼虫。 绦虫卵 假叶目虫卵椭圆形,有卵盖,内含卵细胞及卵黄细胞。圆叶目虫卵形状不一,卵壳的厚度和构造也不同,内含一个具有三对胚钩的六沟蚴,六沟蚴被覆两层膜,内层膜紧贴六钩蚴,外层膜与内层膜有一定的距离,有的虫卵六钩蚴被包围在梨形器里,有的几个虫卵被包在卵袋中。 棘头虫卵 多为椭圆形。卵壳三层,内层薄,中间层厚,多数有压痕,外层变化较大,并有蜂窝状构造。内含长圆形棘头蚴,其一端有三对胚钩。 (3)易与虫卵混淆的物质 气泡、花粉颗粒、植物细胞、豆类淀粉粒、霉菌孢子 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。
技能训练16 寄生虫卵的识别 授课时数 教学方式 2学时 实习 56
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 注射器的消毒、使用、安装及常用注射方法。 二、目标要求: 了解注射器的安装与调试,掌握注射器的消毒方法和常用注射方法。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)注射器的消毒方法 金属注射器的消毒 旋松并抽出活塞,取出玻璃管、煮沸消毒。 玻璃注射器的消毒 将活塞抽出。包好后放入煮沸消毒器中进行煮沸消毒,或放入高压锅中进行高压灭菌消毒。 (2)注射器的安装与调试 (3)注射方法: 注射的方法种类很多,其中皮下注射、肌肉注射和静脉注射是临床上最常用的方法。另外,还有皮内、胸腔、腹腔、瓣胃、气管内、脊髓腔及眼结膜等部位的注射。选用什么方法注射,主要根据药物的性质、注射药液的量和畜禽所患疾病的具体情况而定。 (4)注射给药时注意事项 注射前,各项注射用具均应清洗干净,进行煮沸或高压灭菌。 注射用药液是否有变质现象,有无超过有效期,安瓿有无裂缝。 注射部位应剪毛、消毒,注射后亦应用同样方法对注射部位消毒。 吸取药量应准确。 如发生折针事故,应立即用镊子或止血钳夹出断头,必要时进行手术切开取出。 根据病畜情况,采取相应措施。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练17 注射器使用及注射方法 授课时数 教学方式 2学时 实习 畜禽疫病防治教案
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 畜禽常用给药途径。 二、目标要求: 技能训练18 畜禽给药途径 授课时数 教学方式 2学时 实习 通过示教及实际操作,使学生初步学会治疗家畜疾病时常用的给药方法和途径。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)注射法:是用注射器将药液注入禽畜体内的方法。 皮下注射法:应选择皮下组织较多、皮肤松弛的部位。牛、马多在颈侧,猪在耳根的后方或肘后,鸡在颈背部。 肌肉注射法:应选择肌肉较发达的部位,马、牛一般在臀部或颈部,猪在颈侧较为方便,鸡在胸肌。 静脉注射法:马、牛、羊在颈静脉,猪在耳静脉。 腹腔注射法:一般当静脉注射有困难时,可采用腹腔注射。小猪在脐至耻骨前缘连线的中部,离开腹中线左或右约5cm处进行注射。大猪可站立保定,在两侧肷部距髋结节、腰椎横突及最后肋骨等距离的部位注射。 注射时的注意事项 (2)灌服法 灌药器投药法 灌药器一般多用牛角制成的灌角,也可以用橡皮灌药瓶。 胃管投药法 用胃管经鼻投药适用于给马投服水剂药物及有刺激性的药液,特别是大量的水剂药液,用胃管投药较方便,浪费少。灌完药后,再灌少量清水,冲洗胃管及漏斗,然后拔去漏斗,用力吹气。当管内液排尽时,即可迅速折捏管口,缓缓抽出胃管。 灌肠法 常用的有唧筒式和漏斗式两种。 (3)涂擦法 将药直接涂擦在患部周围。 (4)其他 饮水、拌料、喷雾。 2.学生操作 (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 58
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授课顺序 授课内容 技能训练19 免疫接种方法 授课时数 教学方式 2学时 实习 一、实训内容: 学习生物制品的保存、稀释及免疫接种方法。 二、目标要求: 通过实训,使学生了解疫苗的保存、运送方法,掌握疫苗不同的稀释方法和常用的免疫接种途径。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)预防接种前的准备 制定动物免疫接种计划 对所使用的生物制剂进行仔细检查。 对预接种的动物进行临诊观察,必要时进行体温检查。 器械的消毒 对饲养员及相关人员进行免疫接种知识的培训。 (2)疫苗的稀释 各种疫苗使用的稀释液、稀释倍数和稀释方法都有明确规定,必须严格地按生产厂家的使用说明书进行。稀释疫苗用的器械必须是灭菌的。 (3)免疫接种的方法 皮下注射法:对马、牛等大动物皮下注射时,一律采用颈侧部位,猪在耳根后方,家禽在颈部。 皮内注射法:羊痘弱毒疫苗多采用皮内注射,注射部位多在尾根或尾下。 肌肉注射法:马、牛、猪、羊的肌肉注射一律采用臀部或颈部,禽多在胸部。 饮水免疫法:是将可供口服的疫苗混于水中,动物通过饮水而获得免疫。 刺种法:在禽类翅下无毛处避开血管,用刺种针或蘸笔尖蘸取疫苗刺入皮下,为可靠起见,最好刺两下。 滴鼻、点眼法:用乳头管吸取疫苗(约0.03~0.04mL)滴于鼻孔或眼内1~2滴。 气雾免疫法:是通过气雾发生器将稀释疫苗喷射出去,使疫苗形成直径为1×10-6~1×10-5m的雾化粒子,均匀地悬浮在空气之中,动物通过呼吸道吸入,以达到免疫目的。 (4)生物药品的保存和运送方法 各种生物制品应保存于低温、阴暗及干燥的场所。 生物制品的运送 要求包装完善,防止碰坏瓶子和散播活的弱毒病原微生物。运送途中避免日光直射和高温,并尽快送到保存地点或预防接种场所。 (5)注意事项 2.学生操作 (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 59
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 常用消毒剂配制及饲养场地的消毒。 二、目标要求: 通过本次实训,使学生掌握消毒剂的配制方法和饲养场的常用消毒方法。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)消毒剂配制要求 所需药品应准确称量,配制浓度应符合消毒要求,不得随意加大或减少。一定使药品完全溶解,混合均匀。 (2)配制方法 先将稀释药品所需要的水倒入配药容器(盆、桶或缸)中,再将已称量好的药品倒入水中完全溶解,混合均匀即成待用消毒液。具体操作如下: ①5%来苏儿溶液 取来苏儿5份加入清水95份,混合均匀即成。 ②20%石灰乳 比例按1kg生石灰加5kg水,搅匀即成。 ③漂白粉乳剂及澄清液 在漂白粉中加入少量水,充分搅成稀糊状,然后按所需浓度加入全部水(25℃左右温水)。 ④10%福尔马林溶液 福尔马林为40%甲醛溶液(市售商品)。按10mL福尔马林加90mL水的比例配成(即4%甲醛溶液),如需其他浓度溶液,同样按比例加入福尔马林及水。 ⑤粗制氢氧化钠溶液 如欲配4%氢氧化钠溶液,称40g氢氧化钠,加水1000mL(60~70℃)搅匀溶解即成。 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。 技能训练20 常用消毒剂配制及使用 授课时数 教学方式 2学时 实习 60
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授课顺序 授课内容 一、实训内容: 病死动物尸体解剖及尸体处理。 二、目标要求: 通过实训,使学生初步正确掌握传染病动物尸体的运送、剖检及处理方法。 三、教学过程: (一)导入新课(约10 min) (二)教学内容(约70 min) 1.讲解示教: (1)病鸡的解剖 鸡的致死:活鸡用脱颈法或颈部放血法致死。 了解死禽的一般状况 外部检查 切开皮肤并做皮下检查 剖检体腔、检查内脏 内脏的取出和检查 (2)病(死)猪的解剖 病史调查 外部检查 剖检方法 (3)病(死)牛羊的解剖 外部检查:包括检查畜别、品种、年龄、性别、毛色、营养状态、皮肤和可视黏膜以及部分尸征等。 内部检查 包括剥皮、皮下检查、体腔的剖开及内脏器官的检查等。 (4)尸体的处理 尸体的运送 处理尸体的方法:掩埋法、焚烧法、化制法、发酵法 2.学生操作: (三)总结、答疑(约10 min) 四、教学方法:实验室讲解、示教、多媒体。 五、作业: 写出实习报告。
技能训练21 病死动物尸体解剖及尸体处理 授课时数 教学方式 2学时 实习 61
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